1、形成子囊孢子
Lodder和Kreger Van Rij(1952)推薦用改良的載玻片培養(yǎng)技術檢測擲孢酵母科中擲 孢子的產生。檢測時常使用一種很細的U形玻璃棒。將U形玻璃棒、載玻片和濾紙片擺 放在培養(yǎng)培養(yǎng)皿內一起滅菌。將瓊脂培養(yǎng)基(酵母浸膏、粗磨玉米粉或馬鈴薯葡萄糖瓊脂)加 到一個載玻片上,在瓊脂上接種酵母菌后將其翻轉,置于U型玻璃棒上的另一個載玻片 上,蓋上培養(yǎng)基蓋,置于25培養(yǎng)。培養(yǎng)后,在顯微鏡鏡下觀察下層的載玻片是否有擲孢 子產生,再觀察上層載玻片上酵母菌的形態(tài)和培養(yǎng)特性。
2、形成擲孢子
推薦用改良的載玻片培養(yǎng)技術檢測擲孢酵母科中擲孢子的產生。檢測時常使用一種很細的口形玻璃棒。將U形玻璃棒、載玻片和濾紙片擺放在培養(yǎng)皿內一起滅菌。將瓊脂培養(yǎng)基(酵母浸膏、粗磨玉米粉或馬鈴薯葡萄糖瓊脂〕加到一個載玻片上,在瓊脂上接種酵母菌后將其翻轉,置于I:型玻璃棒上的另一個載玻片上,蓋上培養(yǎng)皿蓋,置于25培養(yǎng)。培養(yǎng)后,在顯微鏡鏡下觀察下層的載玻片是否有擲孢子產生,再觀察七層載玻片上酵母菌的形態(tài)和培養(yǎng)特性。
3、發(fā)酵糖類
將酵母菌接種于含糖的發(fā)酵肉湯管中(預先裝有倒置的發(fā)酵管),該肉湯中含有0.5%酵母膏和2%的糖類物質,同時配制無糖的陰性對照管(有的酵母膏中含有能使酵母菌發(fā)酵的海藻糖〉,25培養(yǎng)10d,每天進行觀察。
4、利用乙酵作為唯一碳源
在乙醇肉湯管中接種少量待測的酵母菌,同時接種一管不含乙醇的肉湯培養(yǎng)基。25培養(yǎng)3周以上,隨時觀察其生長情況。在培養(yǎng)基中,酵母膏溶液能夠提供維生素和生長因子,所以檢測酵母菌生長狀況時,必須同時用含有和不含乙醇的雙管肉湯對比培養(yǎng),以確保不產生假陽性結果。
5、對環(huán)乙酰亞胺的耐受力
將酵母菌接種于經過濾除菌,每毫升含有0. 5%的葡萄糖和100μg兩環(huán)乙酰亞胺的酵 母菌氮基礎0392培養(yǎng)基中,25培養(yǎng)4周,每周觀察其生長情況。第1周生長良好的說 明菌種對環(huán)乙酰亞胺的耐受力強,第3~4周菌體生長仍不好甚至不生長的,說明菌種對環(huán)乙酰亞胺十分敏感。